临床麻醉学杂志

作者：李亚琦,陈祎轩,张静,余树春

单位：330006,江西省人民医院(南昌医学院第一附属医院)麻醉科,南昌大学第二附属医院麻醉科,南昌大学第二附属医院麻醉科,南昌大学第二附属医院麻醉科

关键词：心肌,缺血-再灌注,治疗性浅低温,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3,沉默信息调节因子2同源蛋白3,炎性小体,线粒体,

基金：国家自然科学基金（81760338）；江西省中医药管理局科技计划项目（2022B1038）；江西省卫生健康委员会科技计划项目（202310106）

目的：分析NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎性小体在治疗性浅低温（34 ℃）后处理的大鼠离体心肌缺血-再灌注模型中的作用并探讨其机制。方法：选择清洁级成年雄性SD大鼠60只，7～10周龄，体重250～300 g。采用随机数字表法将大鼠分为五组：空白对照组（S组）、心肌缺血-再灌注组（IR组）、34 ℃浅低温后处理心肌缺血-再灌注组（MH组）、34 ℃浅低温后处理心肌缺血-再灌注+3-TYP组（HT组）和34 ℃浅低温后处理心肌缺血-再灌注+3-TYP+MCC950组（HTM组），每组12只。S组在37 ℃灌流液平衡灌流大鼠心脏180 min；IR组在37 ℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 min后，缺血30 min，37 ℃灌注液再灌注120 min；MH组在37 ℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 min后，缺血30 min，34 ℃灌注液再灌注120 min；HT组在37 ℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 min后，缺血30 min，在灌注液中加入沉默信息调节因子2同源蛋白3（sirt3）抑制剂3-TYP后行34 ℃灌注液再灌注120 min；HTM组在37 ℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30 min后，缺血30 min，在灌注液中加入sirt3抑制剂3-TYP和NLRP3抑制剂MCC950后行34 ℃灌注液再灌注120 min。再灌注120 min后取离体心脏，采用ELISA法测定灌注后心脏漏液中IL-1β、IL-6浓度，Western blot法检测心肌组织中NLRP3和sirt3蛋白相对含量，1%氯化三苯基四氮唑染色计算心肌梗死面积，HE染色观察心肌病理变化。结果：与S组比较，IR组、MH组、HT组和HTM组再灌注30、60、90、120 min时HR明显减慢，LVSP、dp/dtmax明显降低，LVEDP明显升高；心脏漏液中IL-6和IL-1β浓度、心肌梗死面积百分比明显升高（P＜0.05）；IR组、HT组和HTM组心肌组织中sirt3蛋白含量明显降低，NLRP3蛋白含量明显升高（P＜0.05）；MH组心肌组织中sirt3和NLRP3蛋白含量明显升高（P＜0.05）。与IR组比较，MH组和HTM组再灌注30、60、90、120 min时HR明显增快，LVSP、±dp/dtmax明显升高，LVEDP明显降低；心脏漏液中IL-6和IL-1β浓度、心肌梗死面积百分比明显降低（P＜0.05）；MH组心肌组织中sirt3蛋白含量明显升高，NLRP3蛋白含量明显降低（P＜0.05）；HTM组心肌组织中NLRP3蛋白含量明显降低（P＜0.05）。与MH组比较，HT组再灌注30、60、90、120 min时HR明显减慢，LVSP、±dp/dtmax明显降低，LVEDP明显升高；心脏漏液中IL-6和IL-1β浓度、心肌梗死面积百分比、心肌组织中NLRP3蛋白含量明显升高（P＜0.05）；HT组和HTM组心肌组织中sirt3蛋白含量明显降低（P＜0.05）。与HT组比较，HTM组再灌注30、60、90、120 min时HR明显增快，LVSP、±dp/dtmax明显升高，LVEDP明显降低；心脏漏液中IL-6和IL-1β浓度、心肌梗死面积百分比、心肌组织中NLRP3蛋白含量明显降低（P＜0.05）。结论：治疗性浅低温（34 ℃）可通过改善离体心脏血流动力学参数、降低IL-6、IL-1β浓度、心肌组织中NLRP3蛋白含量、心肌梗死面积百分比、改善心肌病理学改变，减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤，其机制可能与线粒体介导sirt3通路抑制炎性小体NLRP3的高表达有关。

来源：2024年第02期

《临床麻醉学》期刊编辑部

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