临床麻醉学杂志

作者：宋新婷,尹宁

单位：211100,南京医科大学附属逸夫医院麻醉科,211100,南京医科大学附属逸夫医院麻醉科

关键词：肺动脉高压,缺氧性肺血管收缩,缝隙连接蛋白,环氧二十碳三烯酸,5-羟色胺,慢性缺氧,

基金：南京市科技局项目（201803068）

目的 探讨环氧二十碳三烯酸（EET）、五羟色胺（5-HT）、缝隙连接蛋白40（Cx40）和43（Cx43）在慢性缺氧性肺血管收缩所致肺动脉高压中的作用。方法 选择SPF级BALB/c小鼠40只，8周龄，体重25～29 g。实验一：采用随机数字表法将小鼠分为两组：对照组（O组，n=8）和慢性缺氧模型组（H组，n=32）。所有小鼠正常饮食，O组在正常环境喂养4周，H组予低氧舱（每天吸入10%氧气10 h）喂养4周后，监测MAP和平均肺动脉压（mPAP）。随后处死小鼠，取心肺组织称量并计算右心室肥厚指数。实验二：O组和H组于显微操作下用胶原酶消化法分离远端肺小动脉血管，采用荧光免疫组化法鉴定肺动脉内皮细胞（PAEC）和肺动脉平滑肌细胞（PASMC）。采用随机数字表法将H组分离得PAEC和PASMC进一步分为三组：缺氧+si-Cx40组（H40组）、缺氧+si-Cx43组（H43组）和缺氧+无义siRNA组（HN组），H40组和H43组PAEC和PASMC分别接受Cx40基因和Cx43基因的特异性siRNA脂质体siPORTNeoFX转染，HN组接受无义siRNA转染。所有细胞在10%氧气条件下进行传代培养。采用qPCR检测Cx40和Cx43 mRNA表达量，MTT实验检测细胞增殖情况，ELISA法检测EET和5-HT浓度，免疫组织化学法检测PASMC中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、平滑肌蛋白-22α（SM22α）和2r骨形态发生蛋白（BMP2r）含量。结果 实验一：H组MAP、mPAP和右心室肥厚指数均明显高于O组（P<0.05）。实验二：与HN组比较，H40组PAEC和PASMC中Cx40 mRNA表达量明显降低（P<0.05）；H43组PAEC和PASMC中Cx43 mRNA表达量明显降低（P<0.05）；H43组和H40组PAEC中EET浓度明显升高（P<0.05），PASMC中EET和5-HT浓度、α-SMA和SM22α含量明显降低（P<0.05），PASMC中BMP2r含量明显升高（P<0.05）。与H40组比较，H43组PAEC中EET浓度明显升高（P<0.05），PASMC中EET和5-HT浓度、α-SMA和SM22α含量明显降低（P<0.05），PASMC中BMP2r含量明显升高（P<0.05）。结论 PAEC感受缺氧信号，合成分泌增加的EET、5-HT通过Cx40和Cx43转移至PASMC中，促进平滑肌细胞的增殖和收缩蛋白α-SMA、SM22α的表达。通过阻断缝隙连接之间EET、5-HT的转运，有助于减轻缺氧性肺血管收缩和肺动脉高压。

来源：2022年第07期

《临床麻醉学》期刊编辑部

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