临床麻醉学杂志

作者：程中亮,马霞青,许涛,王爱忠

单位：201306,上海海洋大学水产与生命学院,南通大学附属医院麻醉科,上海交通大学附属第六人民医院麻醉科,上海交通大学附属第六人民医院麻醉科

关键词：吗啡耐受,丙酮酸脱氢酶激酶4,丙酮酸脱氢酶,磷酸化,小鼠,

基金：国家自然科学基金（81772062）

目的 探讨脊髓背角星形胶质细胞中丙酮酸脱氢酶激酶4（PDK4）在吗啡耐受小鼠中的作用。方法 SPF级雄性C57b1/6小鼠24只，6～8周龄，体重22～25 g。采用随机数字表法分为四组：生理盐水组（C组）、吗啡组（M组）、PDK4抑制剂二氯乙酸（DCA）组（D组）和吗啡+DCA组四组（MD组），每组6只。C组鞘内注射生理盐水10 μl，每日2次，连续5 d；M组、D组和MD组分别鞘内注射含吗啡10 μg、DCA 200 μg和吗啡10 μg+DCA 200 μg的生理盐水10 μl，每日2次，连续5 d。首次给药前和每日第1次给药后1 h检测小鼠甩尾潜伏期（TFL）。最后一次给药后处死小鼠，采用Western blot法检测脊髓背角中PDK4、磷酸化丙酮酸脱氢酶（p-PDH）、p-S293-PDH、p-S300-PDH蛋白含量，免疫荧光组织化学法检测脊髓背角中PDK4与星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）共表达情况。结果 与首次给药前比较，第1—5天第1次给药后1 h M组和MD组TFL明显延长（P<0.05）。与C组比较，M组第1—5天第1次给药后1 h TFL明显延长（P<0.05），脊髓背角PDK4、p-S300-PDH、p-S293-PDH蛋白含量明显升高（P<0.05）；MD组第1—5天第1次给药后1 h TFL明显延长（P<0.05），脊髓背角p-S293-PDH蛋白含量明显升高（P<0.05）。与M组比较，D组第1—5天第1次给药后1 h TFL明显缩短（P<0.05）；MD组第3—5天第1次给药后1 h TFL明显延长（P<0.05）；D组和MD组PDK4、p-S293-PDH、p-S300-PDH蛋白含量明显降低（P<0.05）。与D组比较，MD组第1—5天第1次给药后1 h TFL明显延长（P<0.05），脊髓背角p-S293-PDH蛋白含量明显升高（P<0.05）。PDK4蛋白在脊髓背角细胞中表达，并与星形胶质细胞标志物GFAP共表达。结论 吗啡耐受小鼠的脊髓背角星形胶质细胞中PDK4蛋白含量升高，PDK4抑制剂DCA抑制了下游p-S293-PDH和p-S300-PDH蛋白的表达。

来源：2022年第10期

《临床麻醉学》期刊编辑部

查看临床麻醉学杂志2022年第10期