临床麻醉学杂志

作者：雷道赟,谢松辉,刘莉,江文杰,韩超

单位：214200,江苏大学医学院,214200,江苏大学医学院,214200,江苏大学医学院,江苏大学附属宜兴医院麻醉科,江苏大学附属宜兴医院麻醉科

关键词：蛋白激酶C-θ,吗啡,Th2细胞分化,

基金：江苏省六大人才高峰项目(2016WSW 113)；江苏大学临床医学科技发展基金项目（JLY20180062）；无锡市卫健委青年科研项目（Q201828）;宜兴市科技局社会发展项目（2016 11）

目的 探讨蛋白激酶C-θ（PKC-θ）在吗啡诱导初始T细胞分化模型中的作用及潜在机制。方法 取小鼠脾脏，制备单细胞悬液，使用分离试剂盒获得初始T细胞。将提纯的初始T细胞分为六组：对照组、吗啡组、纳洛酮（吗啡拮抗剂）组、AEB071（PKC-θ抑制剂）组、吗啡+纳洛酮组和吗啡+AEB071组。按组别加入不同刺激物培养，收取细胞，采用流式细胞仪检测Th1和Th2细胞数量，采用ELISA法检测细胞因子IL-4和IFN-γ浓度，采用Western blot法检测PKC-θ S676、T538两个位点的磷酸化水平，采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测GATA3 mRNA表达量，采用凝胶迁移实验（EMSA）检测GATA3转录活性。结果 与对照组比较，吗啡组Th2细胞数量明显增多，IL-4浓度明显升高，PKC-θ S676、T538两个位点的磷酸化水平明显升高，GATA3 mRNA表达量及转录活性均明显升高（P<0.01）。与吗啡组比较，吗啡+纳洛酮组和吗啡+AEB071组Th2细胞数量明显减少，IL-4浓度明显降低，PKC-θ S676、T538两个位点的磷酸化水平明显降低，GATA3 mRNA表达量及转录活性均明显降低（P<0.01）。六组Th1细胞数量和IFN-γ浓度差异无统计学意义。结论 吗啡通过μ受体激活PKC-θ调控Th2细胞分化，PKC-θ可能作为逆转吗啡免疫抑制功能的一个干预靶点。

来源：2020年第06期

《临床麻醉学》期刊编辑部

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